核酸提取纯化方法

核酸提取纯化方法

核酸提取纯化方法如下：

1.电泳法:利用电泳技术将核酸从混合物中分离出来，再用某种方法将它从电泳胶中分离出来，从而获得纯化的核此和酸。

2.离心分离此和法:利用离心力将核酸从混合液中分离出来，再用某种方法将它从离心液中分离出来，从而获得纯化的核酸。

3.水解法:利用酶将核酸水解成小分子片段，再用某种方法将它们分埋扒凯离出来，从而获得纯化的核酸。

4.硅胶柱法:将核酸溶液中的成分通过硅胶柱分离，从而获得纯化的核酸。

5.氯仿沉淀法:将核酸溶液中的成分用氯仿沉淀，从而获得纯化的核酸。

在提取核酸时，利用了核酸的什么特性

核酸分离、纯化原则：1.保持核酸分子一级结构的完整弯唤性.因为遗传信息全部储存在一级结构之中,核酸的—级结构还决定其高级结构的形式以及和其他生物大分子结合的方式。

2.分离核酸原则:1）温度不要过高；2）控弯唤制pH值范围(pH值5-9); 3）保持一定离子强度; 4）减少物理因素对核酸的机械剪切力。

在核酸分离提取中最重要的是要防止核酸的生物降解,细胞内或外来的各种核酸酶能消化核酸链中的磷酸二酯键,破坏核酸一级结构.所用器械和一些试剂需高温灭菌,提取缓冲液中需加核酸酶抑制剂。

常用的DNA酶抑制剂有1.金属离子螯合剂：如EDTA-Na2(乙二胺四乙酸二钠)、8-羟基喹啉.2.阴离于型表面活性剂如SDS,该试剂除对核酸酶有抑制作用外,还能使蛋白质变性,并与变性蛋白埋扒凯结合成带负电荷的复合物,该复合物在高盐溶液中沉淀。

常用的RNA酶（RNAase)抑制剂有：1.皂土（bentonite ）作用机制：皂土带负电荷,能吸附RNase,使其失活.2. DEPC(二乙基焦碳酸盐) (C2H5OCOOCOOC2H5)粘性液体,很强的核酸酶抑制剂.作用机制：与蛋白质中His结合使蛋白变性。