DTT用来保护蛋白的终浓度是什么

DTT用来保护蛋白的终浓度是什么

因烂歼卖为有些蛋白有半胱氨酸的存在，所以会形成很多-SH键来维持蛋白质的高级结构又因为-SH键具有很强的还原性，为了避免-SH被氧化而造成蛋白失去活性，所以需要加入DTT来保护-SH键不被还原掉。但是DTT量太高的话又会破坏掉二硫键。也就是说DTT浓度太低起不到保护作用，浓度饥逗太高又会破坏结构。所以如果一些蛋白需要添加的话一般是建议在改团0.5mM~1.5mM之间。以摩尔数计算，5-10倍的量来保护-SH。如果蛋白报存buffer中含有15%左右的甘油，对蛋白具有很好的稳定作用。补充一点：如果dtt和蛋白摩尔比例比例增大到1：100，DTT就能破坏2硫键了，这时对应的浓度一般在10mM左右。